Anwendungen der Fluoreszenzmikroskopie

Identifizieren Sie Strukturen in festen und lebenden biologischen Proben.
Fluoreszenzmikroskopieist heute ein gängiges Werkzeug in der biowissenschaftlichen Forschung, da es die Verwendung von Mehrfarbenfärbung, die Markierung intrazellulärer Strukturen und die Messung zellulärer physiologischer Zustände ermöglicht.
Vorteile der Fluoreszenzmikroskopie
Die Fluoreszenzmikroskopie ist die beliebteste Methode zur Untersuchung dynamischer Verhaltensweisen bei der Bildgebung lebender Zellen.
Dies liegt an seiner Fähigkeit, einzelne Proteine ​​mit hoher Spezifität in nicht fluoreszierenden Materialien zu trennen.
Die Empfindlichkeit ist hoch genug, um bis zu 50 Moleküle pro Kubikmikrometer zu erkennen.
Verschiedene Moleküle können nun mit unterschiedlichen Farben angefärbt werden, sodass mehrere Arten von Molekülen gleichzeitig verfolgt werden können.
Diese Faktoren verleihen der Fluoreszenzmikroskopie deutliche Vorteile gegenüber anderen optischen Bildgebungstechniken sowohl für die In-vitro- als auch für die In-vivo-Bildgebung.
Einschränkungen der Fluoreszenzmikroskopie
Fluorophore verlieren ihre Fähigkeit zu fluoreszieren, wenn sie in einem Prozess namens „Photobleaching“ beleuchtet werden. Photobleichung tritt auf, wenn fluoreszierende Moleküle aufgrund der Ansammlung von während des Fluoreszenzprozesses angeregten Elektronen chemische Schäden ansammeln.
Zellen sind anfällig für phototoxische Wirkungen, insbesondere für kurzwelliges Licht. Darüber hinaus neigen fluoreszierende Moleküle dazu, bei Lichteinwirkung reaktive Chemikalien zu produzieren, wodurch die phototoxische Wirkung verstärkt wird.
Im Gegensatz zu Techniken der Transmissions- und Reflexionsmikroskopie können mit der Fluoreszenzmikroskopie nur spezifische, mit Fluoreszenz markierte Strukturen beobachtet werden.