Bei der Fluoreszenzmikroskopie emittiert die Probe Licht. Wie wäre es? Durch Zugabe von Farbstoffmolekülen zur Probe. Das Farbstoffmolekül wird typischerweise angeregt, wenn es Lichtenergie absorbiert, sodass es die aufgenommene Energie als Licht abgibt. Die von einem angeregten Molekül freigesetzte Lichtenergie hat eine längere Wellenlänge als das von ihm abgestrahlte Licht. Farbstoffmoleküle sind typischerweise fluoreszierende Farbstoffe, die fluoreszieren, wenn sie einer bestimmten Lichtwellenlänge ausgesetzt werden. Das erzeugte Bild stammt von einem fluoreszierenden Farbstoffetikett, das Licht emittiert
Das Prinzip dieses Funktionsmechanismus besteht darin, dass ein Fluoreszenzmikroskop eine Probe ultraviolettem oder ultraviolettem Licht oder blauem Licht aussetzt und dadurch ein durch Fluoreszenz emittiertes Bild der Probe erzeugt. Sie verfügen über eine Quecksilberdampf-Bogenlampe, die einen intensiven Lichtstrahl erzeugt, der durch einen Anregungsfilter fällt. Die Funktion des Anregungsfilters besteht darin, bestimmte Wellenlängen auf die mit Fluoreszenzfarbstoff gefärbte Probe zu übertragen und so ein Bild der Fluoreszenzfarbstoffmarkierung zu erzeugen.
Nach der Objektivlinse befindet sich ein Sperrfilter, dessen Hauptaufgabe darin besteht, jegliche UV-Strahlung zu eliminieren, die für das Licht des Betrachters schädlich sein könnte, und so den Bildkontrast zu verringern.
Anwendungen vonFluoreszenzmikroskopie
Zur Visualisierung bakterieller Erreger wie Mycobacterium tuberculosis.
Wird in Immunfluoreszenztechniken verwendet, um spezifische Antikörper zu identifizieren, die gegen bakterielle Antigene/Krankheitserreger produziert werden, indem die Antikörper mit Fluoreszenzfarbstoffen markiert werden.
Wird in der ökologischen Forschung zur Identifizierung und Beobachtung von mit Fluoreszenzfarbstoffen markierten Mikroorganismen verwendet
Es kann auch zwischen toten und lebenden Bakterien anhand der Farbe unterscheiden, die sie abgeben, wenn sie mit einem speziellen Fleck behandelt werden
Zusätzlich zu den oben besprochenen Mikroskopen gibt es ein weniger häufig verwendetes Mikroskop namens Differential-Interferenz-Kontrastmikroskopie. Es ist der Phasenkontrastmikroskopie sehr ähnlich, bei der das Bild dadurch entsteht, dass Lichtstrahlen abgelenkt oder nicht abgelenkt werden. Der Unterschied besteht darin, dass hier zwei Lichtstrahlen auf die Probe gelenkt und durch ein Prisma fokussiert werden. Ein Strahl durchdringt das Prisma und erreicht die Probe, während der andere Strahl durch einen transparenten Bereich des Objektträgers ohne Probe gelangt. Die beiden Strahlen verschmelzen dann und interferieren miteinander, um ein Bild zu erzeugen. Es kann verwendet werden, um Zellstrukturen ungefärbter Proben wie Endosporen, Bakterienzellwände, Kerne und Granulat zu betrachten.
